1)收货前根据说明书培养条件,提前准备细胞培养所需材料。
2)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
3)收货后没有外观损坏的情况下用75%酒精消毒后将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h等待细胞稳定。
4)细胞稳定后在显微镜下确认细胞生长状态,判断细胞的密度并清晰拍照200倍400倍照片最少2张记录反馈细胞状态以防出现售后作为证据,没有照片和反馈默认接受细胞质量没有问题。
5)贴壁细胞:在运输过程中由于运输颠簸贴壁细胞会有脱落的现象,如发现有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶或者培养皿中,按照说明书细胞培养条件加入新配制的完全培养基。
6)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
注意事项:
A.传代比例:
1个T25瓶传2个6cm的培养皿或者2个T25瓶相当于1:2
1个T25瓶传1个10cm的培养皿或者1个T75瓶相当于1:3
B.由于原代细胞的传代次数和活性是有限的,因此收到细胞后需要规划培养传代和做实验时间点,以防出现原代细胞本身寿命已达最大限度时候才开始做实验,因为这个时候的原代细胞很可能增值能力,形态,状态都已经不是很好了,所以最好提前做好预估判断。
原代细胞发货建议常温活细胞发货状态更加稳定。我们发货的原代细胞T25瓶包装,细胞密度一般在80%上下,充液为常规培养完全培养基,客户可根据自己的实验方案决定是否需要收集起来继续使用3-4天还是抽掉丢弃。