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RNA-PULLDOWN
RNA 与蛋白质相互作用是细胞生理过程中的重要步骤,其中 RNA pull-down 实验用于研究 RNA 分子与蛋白质之间的相互作用关系。
该方法利用特定标记的 RNA 探针(biotinylated RNA)结合目标蛋白质,形成 RNA-蛋白质复合物,并通过亲和纯化形式富集出 RNA 与蛋白质复合物,洗脱实验后可以通过 Western blot 或质谱等技术鉴定 RNA 与蛋白质的结合情况。
实验原理
RNA pull-down 实验基于 RNA 与蛋白质的特异性互相识别和结合,通过连接生物的素分子的 RNA 寡核苷酸可以特异性地结合目标蛋白质。富集 RNA 与蛋白质之间的相互作用复合物后,可通过 Western blot 或质谱等技术进一步研究 RNA 与蛋白质的结合情况。
应用途径
RNA-PULLDOWN实验可以用于研究 RNA 与蛋白质之间的相互作用。其重要应用包括鉴定 RNA 与蛋白质复合物中的成员、筛选 RNA 结合蛋白质的靶标,以及研究 RNA 参与的基因表达调控机制等。
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